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바이오에탄올용 셀룰라아제 — 2세대 셀룰로오스계 에탄올을 위한 농업 부산물의 당화

옥수수 대, 바가스, 밀짚, 목재 칩과 같은 리그노셀룰로오스 바이오매스를 고활성 셀룰라아제 효소를 이용해 발효성 포도당으로 전환하여 2세대 바이오에탄올 당화를 실현하세요.

Short answer

2세대 에탄올은 원료가 전분이 아닌 셀룰로오스이기 때문에 셀룰라아제가 필요합니다. 전처리로 리그닌-헤미셀룰로오스 매트릭스가 열리고 나면, 엔도글루카나아제·셀로비오히드롤라아제·베타글루코시다아제가 함께 작용하는 셀룰라아제 복합체가 셀룰로오스를 발효용 포도당으로 가수분해합니다. 효소 투입량과 전처리 강도는 서로 상충 관계에 있으며, 이것이 플랜트의 경제성을 좌우합니다.

식량과 경쟁하는 전분·당 작물이 아닌 리그노셀룰로오스계 농업 부산물과 에너지 작물에서 생산되는 2세대(2G) 바이오에탄올은 근본적으로 셀룰로오스를 발효성 포도당으로 전환하는 셀룰라아제 효소에 의존합니다. 2G 바이오에탄올 생산에 사용되는 리그노셀룰로오스 원료, 즉 옥수수 대, 사탕수수 바가스, 밀짚, 볏짚, 스위치그래스, 목질계 바이오매스에는 건조 중량 기준 30~50%의 셀룰로오스가 포함되어 있으며, 이는 주된 발효성 기질입니다. 그러나 이 셀룰로오스는 헤미셀룰로오스와 리그닌으로 이루어진 매트릭스에 물리적으로 둘러싸여 효소의 공격을 차단하고 있기 때문에, 효소 당화에 앞서 전처리 단계(희석산, 증기폭쇄, 알칼리, 유기용매 처리 등)가 필요합니다. 리그닌-헤미셀룰로오스 매트릭스를 붕괴시키고 셀룰로오스 표면 접근성을 높이는 전처리 이후, 당화 단계에서 셀룰라아제 효소를 적용하여 셀룰로오스 사슬을 포도당 단량체로 가수분해합니다. 이렇게 가수분해된 포도당 스트림은 이후 사카로미세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) 등의 미생물로 발효되어 에탄올을 생산합니다. 효과적인 리그노셀룰로오스 당화에 필요한 셀룰라아제 효소 시스템은 엔도글루카나아제(EC 3.2.1.4), 셀로비오히드롤라아제(EC 3.2.1.91), 베타글루코시다아제(EC 3.2.1.21)로 구성된 다성분 복합체로, 이들이 함께 상승작용을 일으켜 결정질 셀룰로오스를 셀로비오스와 포도당으로 해중합합니다. 트리코더마 리세이 유래 셀룰라아제는 2G 바이오에탄올 산업의 표준으로 자리 잡고 있는데, 이는 T. reesei가 셀로비오히드롤라아제 함량이 높고 복합체 성분 간 상승작용이 강한, 균형 잡힌 셀룰라아제 복합체를 생산하기 때문입니다. 당화 조건은 일반적으로 pH 4.5~5.5, 45°C~55°C이며, 효소 투입량은 전처리된 기질의 셀룰로오스 함량 대비 설정되고, 전처리 강도, 셀룰로오스 결정화도, 목표 포도당 수율에 따라 달라집니다. 산업용 바이오에탄올 플랜트와 바이오리파이너리에서 효소 비용은 2G 에탄올 경제성의 주요 변수로, 에탄올 리터당 효소 비용은 높은 비활성, 전처리 강도에 맞춘 투입량, 상업적으로 타당한 효소 투입 수준에서의 포도당 수율 최적화를 통해 최소화되어야 합니다. 기술 구매자는 자사의 전처리된 기질에서 달성되는 가수분해 성능, 필요한 베타글루코시다아제 보충 수준, 단백질 함량, 공정 온도에서의 열 안정성을 기준으로 셀룰라아제 효소를 선정합니다.

Updated · cellulase

적용 분야

에탄올 및 포도당 생산을 위한 사탕수수 바가스 셀룰라아제 가수분해

즙 추출 후 남는 섬유질 잔사인 사탕수수 바가스는 셀룰로오스 함량이 35~45%에 달하며, 사탕수수 생산 지역에서 2G 에탄올의 주요 원료입니다. 180~200°C에서 희석산 또는 알칼리·증기 전처리를 거친 바가스는, 전처리에 맞춘 투입량의 셀룰라아제로 pH 4.8~5.0, 48°C~50°C에서 48~72시간 당화됩니다. 고농도 트리코더마 리세이 셀룰라아제 등급은 바가스 매트릭스 내 결정질 셀룰로오스를 효율적으로 가수분해하는 데 필요한 엔도글루카나아제와 셀로비오히드롤라아제 활성을 제공합니다.

밀짚 및 농업 부산물 당화

알칼리 과산화수소, 유기용매, 또는 증기폭쇄로 고형분 농도 10~20%로 전처리된 밀짚, 볏짚, 기타 곡물 부산물은 전처리에 맞춘 투입량의 셀룰라아제로 pH 5.0~5.5, 50°C에서 48~96시간 당화됩니다. 농업 볏짚류는 목질계 바이오매스보다 셀룰로오스 결정화도가 낮아, T. reesei 셀룰라아제로 이러한 조건에서 일반적으로 75~90%의 셀룰로오스 전환율을 달성하며, 초기 고형분 투입량에 따라 당화액 중 포도당 농도는 40~70 g/L 수준입니다.

동시 당화 발효(SSF) 공정

동시 당화 발효(SSF)에서는 셀룰라아제 효소와 발효 효모를 전처리된 바이오매스에 함께 첨가하여, 효소가 생산하는 즉시 효모가 포도당을 소비함으로써 셀로비오스와 포도당에 의한 셀룰라아제의 생성물 저해를 줄입니다. SSF 조건은 일반적으로 pH 5.0~5.5, 37°C~39°C로, 이는 셀룰라아제 최적 온도(50°C)와 효모 발효 최적 온도(30°C~35°C) 사이의 절충안입니다. SSF에서 전처리에 맞춘 투입량의 셀룰라아제 효소는 72~120시간 내에 70~85%의 셀룰로오스 전환율을 달성하며, 에탄올이 동시에 생산되므로 별도의 발효조가 필요하지 않습니다.

제품 사양

항목
활성 범위 다양한 등급 (분말 및 액상)
최적 pH 4.0 – 6.0
최적 온도 45°C – 60°C
형태 연갈색~갈색 분말 또는 액상
유통기한 12개월 (밀봉, 서늘하고 건조한 장소)
포장 25 kg 드럼 (분말) / 30 kg 저리캔 (액상)

자주 묻는 질문

리그노셀룰로오스 바이오매스를 완전히 당화하려면 어떤 셀룰라아제 성분이 필요한가요?

효과적인 리그노셀룰로오스 당화를 위해서는 다성분 셀룰라아제 시스템이 필요합니다. 엔도글루카나아제(EC 3.2.1.4)는 셀룰로오스 사슬 내부의 글리코시드 결합을 무작위로 절단하여 중합도를 낮추고, 셀로비오히드롤라아제(EC 3.2.1.91)는 사슬 말단을 공격하며 결정질 셀룰로오스 가수분해의 주된 역할을 담당하고, 베타글루코시다아제(EC 3.2.1.21)는 셀로비오히드롤라아제의 생성물인 셀로비오스(2당류)를 포도당으로 전환하여, 그렇지 않으면 셀로비오히드롤라아제를 저해하는 셀로비오스 축적을 방지합니다. 트리코더마 리세이는 이 세 가지 성분을 자연적으로 모두 생산하며 셀로비오히드롤라아제 함량이 높아, T. reesei 셀룰라아제가 2G 에탄올 당화의 표준으로 자리 잡고 있습니다. 천연 T. reesei 제제의 베타글루코시다아제 활성이 부족한 경우, 아스퍼질러스 니게르 유래의 보충용 베타글루코시다아제가 추가됩니다.

바이오매스 톤당 셀룰라아제 사용량은 어떻게 계산하나요?

효소 투입량은 원료 바이오매스가 아니라 전처리된 기질 중 셀룰로오스 함량을 기준으로 설정되므로, 계산은 세 단계로 진행됩니다. 첫째, 전처리된 기질의 셀룰로오스 함량을 파악합니다. 일반적으로 건조 중량의 35~50%이며, 전처리 강도에 따라 이 값이 달라지므로 가정하기보다 실제로 측정할 가치가 있습니다. 둘째, 건조 바이오매스 톤 수에 이 셀룰로오스 비율을 곱하여 톤당 셀룰로오스 킬로그램을 산출합니다. 셋째, 해당 기질에서 목표 포도당 수율을 달성하는 데 필요하다고 자체 가수분해 시험에서 확인된 투입량을 적용하고, 이를 구매하려는 등급의 농도에서 바이오매스 톤당 효소 제품 킬로그램으로 환산합니다. 투입량은 2세대 에탄올에서 효소 비용을 좌우하는 가장 큰 변수이므로, 자사의 전처리 원료를 기준으로 설정하고 전처리 강도, 고형분 농도, 체류 시간이 바뀔 때마다 재확인해야 합니다. 기질 분석 자료와 목표 수율을 보내주시면 시험용 등급과 초기 투입량을 추천해 드립니다.

셀룰라아제 당화에 앞서 어떤 전처리가 필요한가요?

전처리가 필요한 이유는 천연 리그노셀룰로오스 바이오매스가 효소의 공격에 매우 강한 저항성을 지니기 때문입니다. 결정질 셀룰로오스는 리그닌과 헤미셀룰로오스에 물리적으로 둘러싸여 있고, 그 결정 구조 자체도 효소 접근을 저해합니다. 효과적인 전처리는 이 매트릭스를 붕괴시켜 셀룰라아제가 접근할 수 있는 셀룰로오스 표면적을 늘립니다. 대표적인 전처리로는 120~200°C의 희석산(헤미셀룰로오스 가용화, 우수한 셀룰로오스 접근성), 160~240°C의 증기폭쇄(물리적 붕괴, 일부 리그닌 재분포), 알칼리 과산화수소(리그닌 산화 및 팽윤), 유기용매를 이용한 리그닌 추출(오르가노솔브) 등이 있습니다. 전처리 방식의 선택은 셀룰로오스 결정화도, 저해물질 생성, 목표 포도당 수율에 필요한 효소 투입량에 영향을 미칩니다.

생성물 저해는 셀룰라아제 성능에 어떤 영향을 미치며, 어떻게 관리하나요?

셀룰라아제 효소, 특히 셀로비오히드롤라아제는 자신의 가수분해 생성물인 셀로비오스와 포도당에 의해 저해됩니다. 당화조 내에 셀로비오스와 포도당이 축적되면 이들이 효소의 활성 부위에 결합하여 반응 속도를 늦춥니다. 포도당 농도가 10~20 g/L를 넘으면 베타글루코시다아제에 대한 포도당 저해가 뚜렷해지고, 이로 인해 셀로비오스가 축적되어 다시 셀로비오히드롤라아제를 저해하게 됩니다. 관리 전략으로는 (1) 셀로비오스를 빠르게 포도당으로 전환하는 베타글루코시다아제 보충 첨가, (2) 효소 대 생성물 비율을 높게 유지하기 위한 고온·고형분 당화, (3) 효모가 지속적으로 포도당을 소비하여 포도당 농도를 낮게 유지하는 동시 당화 발효(SSF), (4) 최대 생성물 농도를 제한하기 위해 효소와 기질을 나누어 투입하는 유가식 당화 등이 있습니다.

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